Оптимизация методики получения Fc-фрагментов IgA человека

Галкин A.Ю. , Горшунов Ю.В. , Соловьева В.Ф.

2015 / Номер 2 [ Прикладная биохимия и биотехнология ]

Целью работы было усовершенствование методики получения и выделения Fc-фрагментов IgА человека. Для достижения поставленной цели проводили оптимизацию условий гидролиза имму- ноглобулинов с последующим выделением и очисткой Fс-фрагментов. Усовершенствованная ме- тодика получения Fc-фрагментов IgА человека предусматривает: папаиновый гидролиз иммуног- лобулинов в среде азота в течение 4 ч, что позволяет достичь максимальный выход F с- фрагментов без их дальнейшей деградации; выделение и очистку Fс-фрагментов IgА путем одно- этапной гель-фильтрации на сефадексе G-100; контроль чистоты целевого продукта при помо- щи электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и иммунодиффузии по Оухтерлони. Использование предложенной схемы позволяет получать Fс-фрагменты IgА человека высокой степени чистоты. Выход Fс-фрагментов после всех этапов очистки составил около 18% от исходного количества иммуноглобулинов в препарате. Молекулярная масса полученных Fc- фрагментов IgА человека составила около 70 кДа.

Ключевые слова:

IgА человека; Fc-фрагменты; фрагментация; папаин; гель-фильтрация; элек- трофорез.

Файлы:

• Реферат (скачать | просмотреть) - скачано 12 раза
• Статья (скачать | просмотреть) - скачано 25 раз